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CRISPR sgRNA文庫定制化

研究基因在代謝通路或某些特定疾病發(fā)生過程中的功能,對于疾病機理研究及藥物研發(fā)具有非常重要的意義。新一代基因編輯技術CRISPR以其操作簡單和通用的獨特優(yōu)勢,成為開展正向遺傳學篩選實驗強有力的工具。利用CRISPR技術建立可能與某類功能相關的突變體庫,通過功能性篩選和富集、PCR擴增及深度測序分析,確認與這類功能相關的基因。

泓迅生物利用獨創(chuàng)的“GPS”(Genotype,Phenotype,Synotype)平臺,提供基于CRISPR sgRNA文庫的一站式基因功能篩選服務。我們專利的Syno?合成技術平臺,可以快速高效地實現sgRNA文庫構建,并包裝成慢病毒混合文庫后轉染細胞。結合高通量/高內涵篩選平臺,利用控制細胞存活、結合免疫染色、流式細胞術等手段篩選得到所需細胞,最終通過測序等方法推斷出發(fā)揮作用的靶基因。

服務優(yōu)勢
  • 針對客戶需求的模式物種進行sgRNA設計
    針對客戶需求的模式物種進行sgRNA設計
  • 自由選擇sgRNA表達載體,提供轉染級質粒
    自由選擇sgRNA表達載體,提供轉染級質粒
  • 提供從sgRNA設計、文庫構建到慢病毒包裝的一站式服務
    提供從sgRNA設計、文庫構建到慢病毒包裝的一站式服務
服務詳情
服務項目 服務詳情 周期
sgRNA設計 針對特定基因分類進行gRNA序列設計
每個基因設計3-6條sgRNA
1-2周
芯片合成 將所設計的所有sgRNA及陰性對照合成在一張芯片上 3-4周
sgRNA文庫構建 將sgRNA構建到客戶的目標載體上 2-3周
文庫質粒大抽 根據發(fā)貨量進行轉染級質粒抽提 1周
文庫質檢及NGS驗證(可選)

1. 克隆覆蓋倍數必須大于100倍
2. 克隆正確率大于70%
3. NGS驗證的文庫正確率大于99%
4. NGS驗證文庫的均一性指標小于10

2-3周
病毒包裝(可選) 慢病毒包裝,病毒滴度: 108TU/ml 2-3周
總計   11-16周
服務流程

 
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