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CRISPR sgRNA載體構(gòu)建

CRISPR-Cas9技術(shù)利用短RNA(gRNA)來(lái)引導(dǎo)核酸酶(Cas9)到達(dá)DNA靶點(diǎn)。該技術(shù)使用簡(jiǎn)單而且擴(kuò)展性強(qiáng)，已被廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室研究、生物醫(yī)學(xué)研究、動(dòng)植物基因工程等領(lǐng)域。包括建立各種遺傳修飾的模式生物模型、建立基因調(diào)控（如敲除、插入、抑制、激活）細(xì)胞系、動(dòng)植物育種、遺傳疾病修復(fù)、癌癥等重大疾病治療以及相關(guān)藥物靶點(diǎn)篩選等。

泓迅生物提供sgRNA質(zhì)粒構(gòu)建服務(wù)，針對(duì)不同物種（動(dòng)物、植物等）提供多種質(zhì)粒構(gòu)建方案，匹配實(shí)驗(yàn)所用材料，提高質(zhì)粒構(gòu)建的成功率，為您提供快速、優(yōu)質(zhì)的sgRNA載體構(gòu)建服務(wù)。

服務(wù)優(yōu)勢(shì)

全模式物種sgRNA設(shè)計(jì)
豐富的質(zhì)粒結(jié)構(gòu)
針對(duì)不同基因設(shè)計(jì)多個(gè)靶點(diǎn)，質(zhì)粒構(gòu)建成功率高
sgRNA活性驗(yàn)證服務(wù)

服務(wù)詳情

步驟	服務(wù)內(nèi)容
明確物種和載體	不同物種不同載體
設(shè)計(jì)靶點(diǎn)	一般在不同轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的共同外顯子上設(shè)計(jì)3-5個(gè)靶點(diǎn)，盡可能破壞重要的domain和所有轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物isoform。
合成	合成前確認(rèn)檢測(cè)靶點(diǎn)是否存在SNP（如果存在SNP，則不能用T7E1酶檢測(cè)是否存在突變）
靶點(diǎn)切割活性檢測(cè)	293T細(xì)胞內(nèi)檢測(cè)SSA活性	酶體外切割活性驗(yàn)證（推薦）
內(nèi)源活性驗(yàn)證（有條件選擇）	若目的細(xì)胞轉(zhuǎn)染率高，如293T細(xì)胞，可轉(zhuǎn)染72h后提基因組，擴(kuò)增靶序列，T7E1酶切驗(yàn)證，進(jìn)一步測(cè)序驗(yàn)證。